Finansavimas

Augalų transformacija yra viena iš pagrindinių augalų biologijos tyrimo priemonių. Naudojant Agrobacterium genties bakterijas galime stabiliai įtraukti naujus genus į augalų branduolio genomus siekiant gauti norimas medžiagas, pavyzdžiui baltymus. Pramonėje ir medicinoje rekombinantinių baltymų ir kitų biomedžiagų paklausa kokybės, kiekio ir įvairovės požiūriu nuolat auga, o tai atveria palankias perspektyvas naujų molekulinio ūkininkavimo technologijų taikymui ir žemės ūkio biotechnologijos plėtojimui Lietuvoje. Siekdami gauti plaukuotas šaknis ir padidinti rizosekretuojamų baltymų gamybos greitį, mes naudojame Agrobacterium rhizogenes gebėjimą sukelti spartų šaknies audinio augimą. Plaukuotos šaknys sugeba gaminti ir išskirti sudėtingus aktyvius glikoproteinus ir specializuotus metabolitus iš didelio organizmų spektro. Plaukuotų šaknų kultūros gali būti naudojamos įvairiose pramonės šakose dėl visiškai kontroliuojamo didelio kiekio auginimo bioreaktoriuose. Tyrimo metu bus atlikta tabako augalų transformacija, naudojant A. rhizogenes ir ekstraląstelinės matricos baltymus imituojančių peptido genu (CMP) transformuotų tabako augalų lapelių eksplantus. Auginant ant agarizuotos terpės bus atrinkta greičiausiai auganti plaukuotų šaknų linija, padauginta, perkelta į skystą terpę. Bus parenkama optimali pradinė šaknelių masė, maitinamoji terpė, jos priedai, auginimo režimas (temperatūra, maišymas) skystoje terpėje bioreaktoriuje. Tiriant sąveiką su endofitais, šaknelės bus inokuliuotos endofitiniais mikrorganizmais. Bus matuojams šaknelių masės pokytis, vertinami šaknų morfologijo pokyčiai. Transgeno raiška bus tiriama DNR bei baltymų hibridizacijos (Southern ir Western blotingo) metodais. Esant poreikiui, bus optimizojams peptido gryninimo sąlygos - tirpalų sudėtis bei audinių ekstrakto paruošimo sąlygos. Šis projektas sudaro galimybę tobulinti motyvuotų studentų praktinius įgūdžius ir darbo laboratorijoje kompetenciją.